細胞計數(shù)是指通過對細胞數(shù)量進行測定來評估細胞生長和細胞活性的一種實驗技術??梢詰糜谏飳W、醫(yī)學、生命科學研究以及藥物研發(fā)等領域。原理基于細胞在顯微鏡下的可見性。細胞本身通常是無色的,但在顯微鏡下,細胞和周圍環(huán)境產(chǎn)生對比,使其能夠被觀察到。通過調節(jié)顯微鏡的焦點和放大倍數(shù),使細胞可以清晰地看到,并進行計數(shù)。
細胞計數(shù)的原理基于顯微鏡觀察和圖像分析。具體的實驗步驟包括:
1.做細胞懸液:將待測細胞樣品溶于適當?shù)木彌_液中,得到細胞懸液。
2.取樣:通過一定的方法(如錐形計數(shù)管)取得細胞懸液的一個小樣本。
3.顯微鏡觀察:將取得的細胞懸液樣本放在顯微鏡的載玻片上,使用適當?shù)姆糯蟊稊?shù)進行觀察。
4.計數(shù):在顯微鏡下,使用計數(shù)室格網(wǎng)(如Hemocytometer)或計數(shù)板,對細胞進行計數(shù)。計數(shù)室格網(wǎng)上有一個或多個已知面積的室格。細胞在其中被視為一個方形或矩形網(wǎng)絡圖,并進行計數(shù)。
5.細胞密度計算:計算出單位體積內(nèi)細胞的平均數(shù)目,從而得到細胞的密度。
細胞計數(shù)板的維護保養(yǎng)方法:
1.使用完畢后,應迅速清洗,防止細胞殘留導致板子上細胞數(shù)量的偏差。
2.使用鑷子或細胞刮片清理計數(shù)室以及計數(shù)板上的污垢。
3.清除鏡片和目鏡上的污漬,以保證清晰的顯微觀察。
4.定期檢查顯微鏡的聚焦功能,確保鏡片和目鏡完好無損。
5.適時更換和其他使用的耗材,以保證準確的細胞計數(shù)結果。
6.存放時應避免直接陽光照射和高溫環(huán)境,防止產(chǎn)生影響結果的變化。